【病毒簡介】
狂犬病病毒(rabies virus)屬于RNA病毒，彈狀病毒科(rhabdoviridae)，狂犬病毒屬(lyssavirus)。病毒形態(tài)一端鈍圓，一端扁平，似子彈，直徑75～80nm，長175～200nm。內(nèi)層為核殼，含40nm核心，外層為致密的包膜，表面有許多絲狀突起，突起物遠端為槌狀。整個病毒表面呈蜂窩狀的六角形結(jié)構(gòu)。病毒的基因組為負鏈單股RNA，分子量為4.6×106。病毒基因組長11932個核苷酸，其中約91%的核苷酸參與編碼五種已知的結(jié)構(gòu)蛋白，即糖蛋白(GP)、包膜基質(zhì)蛋白(M2P)、殼體基質(zhì)蛋白(M1P)、核蛋白(NP)和轉(zhuǎn)錄酶蛋白(LP)?；蚪MRNA與180個NP分子結(jié)合成核糖核蛋白(ribose nucleoprotein，RNP)，使RNA受到良好的保護而不被降解，同時也為基因組的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄提供了一個適宜的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。M2P是狂犬病毒最小的結(jié)構(gòu)蛋白(分子量僅為25×103)，它可連接病毒外膜及膜上GP和核殼。GP是一種典型的跨膜糖蛋白，能與乙酰膽堿受體結(jié)合使病毒具有神經(jīng)毒性，同時可誘發(fā)宿主體內(nèi)產(chǎn)生中和抗體和刺激細胞免疫，對狂犬病病毒的攻擊有保護作用。NP為狂犬病毒的群特異性抗原，可使機體產(chǎn)生補體結(jié)合抗體。NP誘生的抗狂犬病毒保護力是由各種細胞因子(如抗體、單核因子和淋巴細胞等)參與的相互作用產(chǎn)生的;還能對中和抗體有促進作用?？袢《綠P和NP還可能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生干擾素。
狂犬病病毒有兩種病毒株：A)自然病毒(街毒)：能引起狂犬病的天然病毒株，毒力強。潛伏期長(腦內(nèi)接種15～30天以上)，能在涎腺中繁殖，各種途徑感染后均可使動物發(fā)病?？山臃N于雞胚，鼠腦。也可在地鼠腎細胞及二倍體細胞中培養(yǎng)生長。從人與動物分離的病毒是存在于自然界中的野毒株，亦是人或動物發(fā)病的病原體;B)固定毒：由于街病毒連續(xù)在動物腦內(nèi)傳代(50代以上)后，毒力減低，潛伏期縮短，并固定在3～6天，對人和犬失去致病力，不侵犯唾液，不形成內(nèi)基體病的毒株。固定毒對人的致病力明顯減弱，但仍保持很好的抗原性，注入人體后可刺激抗體生成，故可用以制備疫苗。抵抗力不強，在56℃30分鐘或100℃2分鐘條件下即可滅活，但在4℃和0℃以下可分別保持活力達數(shù)周和數(shù)年。一般消毒方法，如日曬、紫外線、甲醛以及季胺類消毒劑(新潔爾滅等)均能將其殺滅，故被狂犬咬傷的傷口可用新潔爾滅沖洗?？袢〔《究稍陔u胚、鴨胚、乳鼠腦以及多種組織培養(yǎng)(如人二倍體細胞、地鼠腎細胞等)中生長，故可用這種方法從病人或病獸體內(nèi)分離病毒和制備疫苗。所有溫血動物均可受染本病，但大多數(shù)地區(qū)的傳染源主要是病犬(約占90%)，病貓、病狼次之。在犬、貓狂犬病已經(jīng)得到控制的地區(qū)，傳染源主要是野生動物，如西歐、北美的狐、臭鼬，中南美的吸血蝙蝠、食蟲蝙蝠等。病人傳染健康人的可能性很小，故也應(yīng)注意隔離。病犬、病狼等的唾液中含病毒較多，于發(fā)病前數(shù)日即有傳染性。
狂犬病毒易被紫外線、甲醛、50%～70%乙醇、氯化汞和季胺類化合物如苯扎溴銨等滅活。其懸液經(jīng)56℃ 30～60min或100℃ 2min即失去活力，但不易被苯酚和甲酚皂溶液殺滅。在冰凍干燥下可保存數(shù)年。被感染的組織可保存在50%的甘油內(nèi)送檢。
用抗狂犬病毒核殼蛋白單克隆抗體可以將狂犬病毒及其相關(guān)病毒分為五個血清型：1型-典型的狂犬病攻擊病毒標準株(challenge virus standard，CVS);2型-拉哥斯蝙蝠狂犬病毒(logosbat virus);3型-莫可拉原型株(Mokola virus);4型-杜文海原型株(duvenhage virus);5型-包括歐洲蝙蝠狂犬病毒：EBL1和EBL2?；蚍中涂煞至停杭椿?、2、3、4型分別與血清1、2、3、4型相對應(yīng)，基因5和6型即為血清5型的EB1和EB2。血清2、3、4、5型和基因2、3、4、5、6型又稱為狂犬相關(guān)病毒，其中野外分布主要為2、3、4型。
【發(fā)病機制】
狂犬病病毒對神經(jīng)組織有強大的親和力，主要通過神經(jīng)逆行，向心性向中樞傳播，一般不入血?？袢《竞?種蛋白，即糖蛋白(G)、核蛋白(N)、雙聚酶(L)、磷蛋白(NS)及基質(zhì)(M)等。后二者為小分子蛋白。G可導(dǎo)致體內(nèi)形成中和抗體，可對抗病毒攻擊。N導(dǎo)致的抗體但不具中和力，可用檢測漿內(nèi)包涵體。 狂犬病發(fā)病過程可分為下列3個階段：
1.病毒繁殖：病毒自咬傷部位皮膚或黏膜侵入后，首先在局部神經(jīng)外，即傷口附近的橫紋肌細胞內(nèi)小量繁殖，通過和神經(jīng)肌肉接頭的乙酰膽堿受體結(jié)合，侵入附近的末梢神經(jīng)。從局部傷口至侵入周圍神經(jīng)不短于72h。從局部傷口至侵入周圍神經(jīng)的間隔時間一般為3日以內(nèi)，也有認為病毒在入侵處可停留2周之久，甚或更長(占潛伏期的大部分時間)。
2.侵入中樞神經(jīng)：沿周圍神經(jīng)的軸索漿向心性擴散，其速度約每小時3mm(5cm/d)到達背根神經(jīng)節(jié)后，開始大量繁殖，然后侵入脊髓，再波及整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)。主要侵犯腦干和小腦等部位的神經(jīng)元。但亦可在擴散過程中終止于某部位，形成特殊的臨床表現(xiàn)。
3.擴散：即病毒自中樞神經(jīng)系統(tǒng)向周圍神經(jīng)離心性擴散，侵入各組織與器官，尤以涎腺、舌部味蕾、嗅神經(jīng)上皮等處病毒最多。由于迷走神經(jīng)核、吞咽神經(jīng)核及舌下神經(jīng)核的受損，可發(fā)生呼吸肌和吞咽肌痙攣，臨床上患者出現(xiàn)恐水、呼吸困難、吞咽困難等癥狀;交感神經(jīng)受刺激，使唾液分泌和出汗增多;迷走神經(jīng)節(jié)、交感神經(jīng)節(jié)和心臟神經(jīng)節(jié)受損，可引起患者心血管系統(tǒng)功能紊亂，甚至突然死亡。
目前認為，病毒的局部存在并非導(dǎo)致臨床表現(xiàn)差異的惟一因素，體液免疫及細胞介導(dǎo)免疫早期有保護作用，但當病毒進入神經(jīng)細胞大量增生后，則免疫介導(dǎo)的損害和發(fā)病也有一定關(guān)系，免疫抑制小鼠接種狂犬病毒后死亡延遲，被動輸入免疫血清或免疫細胞后，則死亡加速。在人類狂犬病，其淋巴細胞對狂犬病毒細胞增生反應(yīng)為陽性者多為狂躁型，死亡較快。對髓磷脂基礎(chǔ)蛋白(MBP)有自身免疫反應(yīng)者也為狂躁型，病情進展迅速，腦組織中可見由抗體、補體及細胞毒性T細胞介導(dǎo)的免疫性損害。
【病理改變】
非特異性病變：急性彌漫性腦脊髓炎，尤以與咬傷部位相當?shù)谋掣?jié)及脊髓段、大腦的海馬以及延髓、腦橋、小腦等處為重，腦膜通常無病變。腦實質(zhì)呈充血、水腫及微小出血，鏡下可見非特異性變性和炎癥改變、如神經(jīng)細胞空泡形成、透明變性和染色質(zhì)分解、血管周圍單核細胞浸潤等。
而在80%患者的神經(jīng)細胞胞質(zhì)中，則可發(fā)現(xiàn)一種特異而具診斷價值的嗜酸性包涵體，稱為內(nèi)基氏小體(Negribody)。內(nèi)基小體是指具診斷意義的病人腦組織內(nèi)嗜酸性包涵體，為狂犬病毒的擊落，呈圓形或橢圓形，染色后呈櫻桃紅色，直徑約3～10nm，邊緣整齊，內(nèi)有1～2個狀似細胞核的小點，最常見于海馬及小腦浦肯野組織的神經(jīng)細胞中;亦可在大腦皮層的錐細胞層、脊髓神經(jīng)細胞、后角神經(jīng)節(jié)、視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞層、交感神經(jīng)節(jié)等處檢出。內(nèi)基氏小體實為病毒的集落，電鏡下可見小體內(nèi)含有桿狀病毒顆粒。
唾液腺腫脹，質(zhì)柔軟，腺泡細胞明顯變性，腺組織周圍有單核細胞浸潤。胰腺腺泡和上皮、胃粘膜壁細胞、腎上腺髓質(zhì)細胞、腎小管上皮細胞等均可呈急性變性。