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介紹小兒狂犬病的檢查診斷

  狂犬病又名恐水癥,是由狂犬病毒所致的自然疫源性人畜共患急性傳染病。流行性廣,病死率極高,幾乎為100%。⑴對人民生命健康造成嚴重威脅。人狂犬病通常由病獸以咬傷的方式傳給人人體而受到感染。臨床表現(xiàn)為特有的恐水、恐聲、怕風、恐懼不安、咽肌痙攣、進行性癱瘓等。

  小兒狂犬病檢查診斷

  1、血、尿常規(guī)及腦脊液 白細胞總數(shù)自(12~30)×109/L不等,中性粒細胞百分率大多在80%以上,大單核細胞百分率亦可增加。尿常規(guī)檢查??砂l(fā)現(xiàn)輕度蛋白尿,偶有透明管型。腦脊液的壓力在正常范圍或稍有增高,蛋白質(zhì)輕度增高,細胞數(shù)稍增多,但很少超過200×106/L,主要為淋巴細胞。

  2、免疫學試驗

  (1)血清中和抗體或熒光抗體測定:對未注射過疫苗、抗狂犬病血清或免疫球蛋白者有診斷價值。缺點是在病程第8天前不易測出。接種過疫苗的患者,如中和抗體效價超過1∶5000時,對診斷狂犬病仍有價值,因僅注射疫苗者其抗體效價較低。近來亦有采用ELISA進行抗體檢測。

  (2)狂犬病毒抗原檢測:應(yīng)用熒光抗體檢查腦組織涂片、角膜印片、冷凍皮膚切片中的病毒抗原,發(fā)病前即可獲得陽性結(jié)果。方法簡便,數(shù)小時內(nèi)可完成,且與小鼠腦內(nèi)接種檢查內(nèi)氏小體方法有較高的符合率,因此是實際應(yīng)用價值較大的一種試驗。在有經(jīng)驗的實驗室中,免疫熒光試驗的可靠性可達95%以上。最近采用快速狂犬病酶鏈免疫吸附診斷法(rapid rabies enzyme immuno diagnosis,RREID)可用于檢測腦組織中狂犬病毒抗原,只需肉眼觀察或酶標儀測定結(jié)果即可,如陽性反應(yīng)顯示橘黃色,陰性反應(yīng)則無色,甚為快速簡便。

  3、病毒分離 從患者腦組織、脊髓、涎腺、淚腺、肌肉、肺、腎、腎上腺、胰腺等臟器和組織雖可分離到病毒,但機會均不多,自腦脊液和唾液中則更不易分離出病毒;患者的存活時間越長,病毒的分離也越困難。分離病毒可采用組織培養(yǎng)或動物接種,分離出病毒后可用中和試驗加以鑒定。

  4、腦組織動物接種與檢查 均于死后進行,動物接種為將死者腦組織制成10%混懸液接種于小鼠腦內(nèi)(2~3周齡的乳鼠較成年鼠為敏感),陽性者小鼠于6~8天內(nèi)出現(xiàn)震顫、豎毛、尾強直、麻痹等現(xiàn)象,10~15天內(nèi)因衰竭而死亡。死亡小鼠腦組織切片中可發(fā)現(xiàn)內(nèi)氏小體。

  5、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測狂犬病毒核酸 為了能檢側(cè)大多數(shù)狂犬病毒和狂犬相關(guān)病毒,可選擇狂犬病毒核蛋白基因(N)中最保守區(qū)域設(shè)計引物:N1( )(587)5’-TTTTGAGACTGCTCCTTTTTG-3’(605),N2(-)(1029)5’-CCCATATAGCATCCTAC-3’(1013)。取腦組織或病毒感染細胞,先獲得病毒RNA。N1引物用于合成cDNA,然后進行PCR反應(yīng),瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果。

  6、以死者腦組織或咬人動物死亡后的腦組織作病理切片或壓片,用Seller染色及直接免疫熒光法檢查內(nèi)氏小體,陽性率可達70%。

  7、常規(guī)應(yīng)做X線胸片、B超、心電圖、腦CT檢查。

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