自身免疫性溶貧血原因復雜，診斷要根據(jù)實驗室檢查包括血常規(guī)、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、骨髓常規(guī)檢查、血清膽紅素、血漿游離血紅蛋白、血清結合珠蛋白等，一般均可確診。血紅蛋白尿的發(fā)作可作為血管內(nèi)溶血的標志，血紅蛋白快速下降，血紅蛋白下降超過1g/dl提示溶血、出血或血液稀釋，除外后兩者情況后，強力提示溶血性貧血的診斷。
一、自身免疫性溶血性貧血的實驗室檢查
1、血象
血紅蛋白和紅細胞計數(shù)與溶血程度相關，周圍血片可見球形紅細胞、幼紅細胞，偶見紅細胞被吞噬現(xiàn)象，網(wǎng)織紅細胞增多。
2、骨髓象
呈幼紅細胞增生，偶見紅細胞系統(tǒng)輕度巨幼樣變，這與溶血時維生素B12和葉酸相對缺乏有關。
3、有關溶血的檢查
血清膽紅素升高，以間接膽紅素為主;新鮮尿檢查可見尿膽原增高;血清結合珠蛋白減少或消失;可有血紅蛋白尿和Rous試驗陽性。
4、抗人球蛋白(Coombs)試驗
分為直接抗人球蛋白試驗(DAT，檢測紅細胞上的不完全抗體)和間接抗人球蛋白試驗(IAT，檢測血清中的游離抗體)，溫抗體型DAT陽性，部分患者IAT也陽性。當抗體數(shù)低于試驗閾值時，DAT可呈陰性。DAT的強度與溶血的嚴重程度無關，有時本試驗雖呈弱陽性，但發(fā)生了嚴重溶血;反之，有時本試驗呈強陽性，而無明顯溶血的表現(xiàn)。
5、冷凝集素試驗
冷凝集素綜合征時效價增高。
6、冷溶血試驗
又稱Donath-Landsteiner(D-L)試驗。D-L 型自身抗體屬于IgG型免疫球蛋白，在補體的參與下，可通過4℃與37℃兩期溶血試驗加以檢測。陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿患者該試驗陽性。
二、鑒別診斷
1、有溶血性貧血的臨床表現(xiàn)，DAT陽性，除外其他類型的溶血，可診斷為溫抗體型AIHA、
2、如DAT陰性，但臨床表現(xiàn)較符合，腎上腺皮質(zhì)激素或切脾治療有效，除外其他溶血性貧血，可診斷為DAT陰性的AIHA。
3、有雷諾現(xiàn)象，冷凝集素效價顯著增高，或DAT C3 型陽性、抗IgG陰性，可診斷為冷凝集素綜合征。
4、有血紅蛋白尿或Rous試驗陽性，D-L抗體陽性可診斷為陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿。
溫馨提示：與溶血性貧血混淆有急性出血和部分診斷不明的疾病，但它們常是短暫的貧血和網(wǎng)織紅細胞增多為特征。發(fā)生在后腹膜或其他組織間隙的潛在出血，表現(xiàn)為貧血進展迅速和網(wǎng)織紅細胞下降，容易與溶血性貧血混淆。