幽門螺桿菌(Hp)是一種革蘭氏陰性微需氧菌,一般定植在胃黏膜上皮細(xì)胞表面,產(chǎn)生高活性的尿素酶。
尿素酶一方面直接損傷胃黏膜,另一方面分解尿素產(chǎn)生NH3,以保護(hù)Hp免受胃酸和胃蛋白酶的侵襲,而利用Hp的定植和生存。
幽門螺桿菌感染的檢查方法
1、細(xì)菌培養(yǎng)
直接將胃黏膜標(biāo)本劃種到固體培養(yǎng)基上或?qū)⑽葛つ?biāo)本研磨成勻漿后接種,置微氧條件下,相對(duì)濕度90%以上,37℃孵育48~72h后觀察結(jié)果,至少依據(jù)涂片染色鏡檢,尿素酶,過氧化氫酶及氧化酶鑒定。
2、胃活檢黏膜涂片
將活檢黏膜面直接涂抹于清潔玻片上,自然干燥后革蘭染色或復(fù)紅染色,油鏡觀察。
3、組織切片染色
胃黏膜活檢標(biāo)本(宜多點(diǎn)取材)垂直包埋切片,采用Warthin-Starry和Centa銀染色或HE染色,Giem sa染色,熒光素吖啶橙染色,米帕林染色以及無標(biāo)記抗體PAP染色等在油鏡下或熒光顯微鏡下觀察。
4、尿素酶試驗(yàn)
Hp具高度尿素酶活性,能分解尿素產(chǎn)生NH+4,通過測(cè)NH+4存在與否,間接判斷有否Hp感染,有pH指示劑法,分析化學(xué)法和同位素標(biāo)記尿素試驗(yàn)等方法。
5、4C尿素呼氣試驗(yàn)
給患者口服14C尿素,如有Hp感染,20min后患者呼出的氣體中有14CO2,無Hp感染則無14CO2呼出,此試驗(yàn)安全,準(zhǔn)確,重復(fù)性好,但因設(shè)備等原因不易推廣應(yīng)用。
6、血清學(xué)檢查
應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)血清或唾液中的抗Hp IgG或抗Hp IgA,為特異性和敏感性指標(biāo)。
7、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)
可檢測(cè)胃液,胃黏膜,唾液中Hp,陽性率高于尿素酶法。
8、原位鑒定
可應(yīng)用單克隆抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測(cè),Hp特異探針或引物進(jìn)行原位雜交及PCR檢測(cè)。
組織切片染色
胃黏膜活檢標(biāo)本(宜多點(diǎn)取材)垂直包埋切片,采用Warthin-Starry和centa銀染色或HE染色,Giemsa染色,熒光素吖啶橙染色,米帕林染色以及無標(biāo)記抗體PAP染色等在油鏡下或熒光顯微鏡下觀察。
幽門螺桿菌(Hp)感染診斷方法
Hp感染的診斷有多種較為可靠的方法,可從檢測(cè)原理、檢測(cè)意義以及對(duì)人體有無創(chuàng)傷等多角度進(jìn)行各種不同分類。一般依據(jù)對(duì)人體有無創(chuàng)傷分為侵入性和非侵入性診斷方法。侵入性診斷方法主要是依賴胃鏡活檢的方法,包括:快速尿素酶試驗(yàn)(RUT)、胃黏膜直接涂片革蘭染色鏡檢、胃黏膜組織切片染色鏡檢、Hp培養(yǎng)、Hp基因檢測(cè)方法(如PCR、寡核苷酸探針雜交等);但活檢鉗消毒不嚴(yán)格可造成交叉污染。
而非侵入性檢測(cè)方法主要是指不需要內(nèi)鏡檢查的方法,主要包括:13C或14C 尿素呼氣試驗(yàn)(UBT)、15N尿氨排泄試驗(yàn)、糞便Hp抗原檢測(cè)、Hp抗體檢測(cè);該類方法無創(chuàng),病人依從性好。