該方法適用于輔酶Q10。
方法原理:避光操作。供試品制成無水乙醇溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長275nm處檢測輔酶Q10吸收值,計(jì)算出其含量。
試劑:甲醇、 無水乙醇。
1.儀器
高效液相色譜儀、 色譜柱:(十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按輔酶Q10峰計(jì)算不低于3000)、紫外吸收檢測器。
2. 色譜條件
流動(dòng)相:甲醇/無水乙醇=50/50。
柱溫:室溫。
試樣制備
1.稱取供試品
精密稱取該品20mg。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取輔酶Q10對照品適量,同供試品配制,搖勻,即得。
3. 供試品溶液的制備
將供試品加無水乙醇約40mL在50℃水浴中振搖溶解,放冷后,移置100mL量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟:分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長275nm處測定輔酶Q10的吸收值,計(jì)算出其含量。
其他方法
(1)取含量測定項(xiàng)下的供試品溶液,加硼氫化鈉50mg,搖勻,溶液黃色消失。(2)在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與輔酶Q10對照品主峰的保留時(shí)間一致。
(3)該品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與輔酶Q10對照品的圖譜一致。