在我們生活中,想必大家對(duì)于抗原抗體的反應(yīng)都是有一定的了解的吧,那么大家知道抗原抗體反應(yīng)是怎么回事嗎,抗原抗體雜交是什么原理呢,抗原抗體結(jié)合原理是什么呢,下面就讓我們一起來了解一下吧。
抗原與相應(yīng)抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)
這種反應(yīng)可以在體內(nèi)進(jìn)行,也可以在身體之外進(jìn)行??乖贵w反應(yīng)過程是一系列的化學(xué)和物理變化,包括抗體特異性結(jié)合和非特異性聚集的2個(gè)階段,以及親水性膠體對(duì)疏水性膠體的變化。
特點(diǎn)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)主要有三性
即特異性、比例性、可逆性。特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性確定的。
這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步,還將在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域得到更加深入和廣泛的應(yīng)用,比如腫瘤的診斷和特異性治療等。
比例是一個(gè)可見的反應(yīng)遵循一定量的比例關(guān)系,只有當(dāng)濃度比適當(dāng)?shù)目乖涂贵w的產(chǎn)生明顯反應(yīng),在抗原和抗體或抗原的比例略超過反應(yīng)是徹底和免疫復(fù)合物形成的沉淀,大。
而當(dāng)抗原抗體比例超過此范圍時(shí),反應(yīng)速度和沉淀物量都會(huì)迅速降低甚至不出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)??赡嫘允侵缚乖贵w結(jié)合形成復(fù)合物后,在一定條件下又可解離恢復(fù)為抗原與抗體的特性。
由于抗原抗體反應(yīng)是分子表面的非共價(jià)鍵結(jié)合,所形成的復(fù)合物并不牢固,可以隨時(shí)解離,解離后的抗原抗體仍保持原來的理化特征和生物學(xué)活性。
抗原抗體的應(yīng)用
免疫動(dòng)物
(1)抗原
免疫動(dòng)物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細(xì)菌或者其他蛋白質(zhì)抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必須與大分子載體連接??乖挠昧恳暱乖N類及動(dòng)物而異,—次注射小鼠可以少至幾個(gè)微克,免、羊甚至更大的動(dòng)物每次注射的量就相應(yīng)增加,從幾百μg/次至幾mg/次。
〔2)佐劑及乳化
佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放,增加免疫刺激的效果。輔助完全和不完全佐劑。完全佐劑滅活結(jié)核分枝桿菌(如卡介苗)或棒狀桿菌。弗氏佐劑可以從試劑公司購(gòu)買,羊毛脂和石蠟油也可以用1:24混合制備用于自。按1:1比例混合均勻的乳化液乳化佐劑和抗原,放置后不會(huì)出現(xiàn)油水分離。
(3)免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物打豚鼠、家免、小鼠、大鼠等,如果大量生產(chǎn)可用動(dòng)物羊、馬等,動(dòng)物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0mL,家兔為2—4mL??乖庖邉?dòng)物的途徑取決于動(dòng)物種類、抗原特性和是否使用佐劑。
腹腔注射(i.p),肌肉注射(i.m),皮內(nèi)注射(i.d.)和皮下注射(s.c.)適合于任何抗原,這些途徑主要刺激局部淋巴結(jié)發(fā)生免疫應(yīng)答,初次免疫和免疫加強(qiáng)注射均可使用。靜脈注射(i.v.)則只適合于可溶性抗原及分散的單細(xì)胞懸液,且不能使用佐劑,其誘發(fā)的免疫應(yīng)答主要發(fā)生在脾臟。
此外,在單克隆抗體制備時(shí),亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法,尤其對(duì)微量抗原比較實(shí)用。體外免疫方法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時(shí)將脾細(xì)胞或外周血淋巴細(xì)胞(包括B細(xì)胞,T細(xì)胞及抗原遞呈細(xì)胞)與抗原一起作體外培養(yǎng),然后再與骨髓瘤細(xì)胞融合。
初次免疫后要經(jīng)過2—3次以上的免疫加強(qiáng)以保證能形成較高水平的IgC抗體。兩次免疫注射之間的時(shí)間間隔,一般3—4周比較適合大部分動(dòng)物,小動(dòng)物可間隔10—14d,大動(dòng)物則在2月左右。在免疫加強(qiáng)后一次注射后的一周內(nèi)采集抗血清,可獲得高水平的抗體。
抗原抗體反應(yīng)影響抗原抗體反映的條件
1.抗體方面
不同動(dòng)物的免疫血清,其反應(yīng)件存在差異,如家免免疫血清等價(jià)帶寬.通常在抗原過量時(shí)才出現(xiàn)可溶性免疫復(fù)合物;馬的免疫血清的等價(jià)帶較窄,抗原或抗體的少量過剩便易形成可溶性免疫復(fù)合物。