拓?fù)洚悩?gòu)酶 拓?fù)洚悩?gòu)酶有哪些類型(2)

  除了DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶可以產(chǎn)生異構(gòu)變化以外,很多能夠嵌入相鄰堿基之間影響堿基堆集作用的試劑,特別是片狀的染料分子.也能改變DNA的拓?fù)錉顟B(tài),明顯的例子就是溴化乙錠。例如以SV40的CCC分子與溴化乙錠的結(jié)合試驗為例,當(dāng)沒有染料時,此DNA為負(fù)超螺旋,具有較高的沉降常數(shù)(21S);當(dāng)加入染料分子與核苷酸之比為0.05時,沉降數(shù)降至l6S,此時DNA為沒有超螺旋的松弛形式;當(dāng)染料分子和核苷酸的比值增加到0.09時,沉降常數(shù)又上升到大約21S,此時DNA分子為正超螺旋。

  不過要注意的是,溴化乙錠并沒有改變Lk值,只不過是由溴化乙錠分子的嵌入,增加了局部DNA二級結(jié)構(gòu)的緊纏狀態(tài)。因而,隨著嵌入染料分子數(shù)的增多,起初表現(xiàn)為負(fù)超螺旋的減少與消失,隨后便是正超螺旋的增加。這與單鏈DNA結(jié)合蛋白促進(jìn)負(fù)超螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)榕轄罱Y(jié)構(gòu)的情況是類似的。

  拓?fù)洚悩?gòu)酶

  通過切斷DNA的一條或兩條鏈中的磷酸二酯鍵,然后重新纏繞和封口來改變DNA連環(huán)數(shù)的酶。DNA促旋酶。

  DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶

  為催化DNA拓?fù)鋵W(xué)異構(gòu)體相互轉(zhuǎn)變的酶之總稱。催化DNA鏈斷開和結(jié)合的偶聯(lián)反應(yīng),為了分析體外反應(yīng)機制,用環(huán)狀DNA為底物。在閉環(huán)狀雙鏈DNA的拓?fù)鋵W(xué)轉(zhuǎn)變中,要暫時的將DNA的一個鏈或兩個鏈切斷,根據(jù)異構(gòu)體化的方式而分為二個型。切斷一個鏈而改變拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的稱為Ⅰ型拓?fù)洚悩?gòu)酶,通過切斷二個鏈來進(jìn)行的稱為Ⅱ型拓?fù)洚悩?gòu)酶。屬于Ⅰ型的拓?fù)洚悩?gòu)酶,有大腸桿菌的ω蛋白及各種真核細(xì)胞中存在的切斷-結(jié)合酶。

 ?、蛐屯?fù)洚悩?gòu)酶,有存在于細(xì)菌中的DNA促旋酶、噬菌體T4的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ以及真核細(xì)胞中依賴ATP的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ等。另外,噬菌體λ的irt基因產(chǎn)物和噬菌體φX174的基因A的產(chǎn)物等也具有切斷—結(jié)合酶的活性,可認(rèn)為是拓?fù)洚悩?gòu)酶之一種。Ⅰ型拓?fù)洚悩?gòu)酶不需要ATP的能量而催化異構(gòu)體化,作為反應(yīng)的中間產(chǎn)物,在原核生物來說是游離型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端與酶形成共價鍵,而真核生物是3′-OH末端5′-磷酸末端與酶形成共價鍵。此酯鍵中所貯存的能量,可能在切斷端的再結(jié)合上起著作用。

  使超螺旋DNA在每一切斷—結(jié)合反應(yīng)中,使L數(shù)發(fā)生一種變化,即松弛。將互補的單鏈環(huán)狀DNA轉(zhuǎn)變成具有螺旋結(jié)構(gòu)的雙鏈環(huán)狀DNA,使單鏈DNA打結(jié)或解結(jié)。另外在二個環(huán)狀雙鏈DNA一個分子的一個鏈切斷時,形成鏈環(huán)狀二聚體的分子。

  在Ⅱ型拓?fù)洚悩?gòu)酶中,DNA促旋酶可單獨催化閉環(huán)狀DNA產(chǎn)生超螺旋,這是獨特的。其它二個型的酶,除可使超螺旋松弛也需要ATP的能量外,還可催化促旋酶的催化反應(yīng)。真核細(xì)胞的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ,參與核小體的形成,細(xì)菌的ω蛋白參與轉(zhuǎn)錄和某種轉(zhuǎn)位子的插入。促旋酶和T4拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ參與DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程。

  DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I催化4種反應(yīng)

  ①超螺旋的松弛;

 ?、诶K結(jié)(knot)的形成;

 ?、郗h(huán)狀雙鏈分子的形成;

  ④環(huán)狀雙鏈分子的連接。

  作用

  Ⅱ型拓?fù)洚悩?gòu)酶

 ?、蛐屯?fù)洚悩?gòu)酶巧妙地執(zhí)行了打開DNA雙螺旋的過程。它將DNA的一個雙螺旋結(jié)構(gòu)切開,并讓另一個螺旋從缺口處穿過,在此之后一個雙螺旋便被打開。

  結(jié)語:看了上面的內(nèi)容,大家是不是對拓?fù)洚悩?gòu)酶有了初步的了解呢,對于拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用是不是有了一定的了解呢。因此,如果你想要了解dna聚合酶的話,則可以多多以上內(nèi)容哦,相信對你了解dna聚合酶會有所幫助的。

拓?fù)洚悩?gòu)酶 拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用 拓?fù)洚悩?gòu)酶的類型 
警惕 這類人不能吃香菜
警惕 這類人不能吃香菜香菜在我們的日常生活中是一種配菜。經(jīng)常可以看到煮...
10個簡單小妙招巧治鼻炎
10個簡單小妙招巧治鼻炎鼻炎相信很多的人都不陌生吧。鼻炎的反復(fù)發(fā)作是否給...
高血壓的治療與飲食
高血壓的治療與飲食現(xiàn)在由于生活條件的提高,三高人群也逐漸的擴大年輕...