dna聚合酶是可以復(fù)制細(xì)胞DNA的一種重要作用酶。那dna聚合酶有什么功能呢?dna聚合酶的分類又有哪些呢?相信有許多人都是不知道的,不過沒關(guān)系,今天小編就來為大家一一解答一下。想知道的朋友不妨就來看一下吧。
dna聚合酶有哪些功能呢?對于很多人來說,dna聚合酶是陌生的。所以也不會知道dna聚合酶的功能。既然不知道,那下面小編就來為大家解答一下吧。
一、聚合作用
在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。
酶的專一性主要表現(xiàn)為新進(jìn)入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進(jìn)入結(jié)合位點后,可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化,促進(jìn)3'-OH與5'-PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。
如果是錯誤的核苷酸進(jìn)入結(jié)合位點的話,則是不能與模版配對的,因此也無法改變酶的構(gòu)象而被3'-5'外切酶活性位點所識別并切除之。
二、3'→5'外切酶活性──校對作用
這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識別和切除不配對的DNA生長鏈末端的核苷酸。當(dāng)反應(yīng)體系中沒有反應(yīng)底物dNTP時,由于沒有聚合作用而出現(xiàn)暫時的游離現(xiàn)象,從而被3'→5'外切酶活性所降解。
如果提高反應(yīng)體系的溫度可以促進(jìn)這種作用,這表明溫度升高使DNA生長鏈3'末端與模板發(fā)生分離的機(jī)會更多,因而降解作用加強(qiáng)。
當(dāng)向反應(yīng)體系加入dNTP,而且只加放與模板互補(bǔ)的上述核苷酸才會使這種外切酶活性受到抑制,并繼續(xù)進(jìn)行DNA的合成。
由以上結(jié)論可退出,3'-5'外切酶活性的主要功能就是校隊作用,并且當(dāng)加入核苷酸與模版不互補(bǔ)而游離時,則是會被3'-5'外切酶切除,以便重新在這個位置上聚合對應(yīng)的核苷酸。
在某些T4噬菌體突變株中DNA復(fù)制的真實性降低,而易發(fā)生突變,從此突變株分離得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。
相反,另外一些具有抗突變能力的T4突變株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA復(fù)制真實性好,變異率低??梢?,3'→5'外切酶活性對DNA復(fù)制真實性的維持是十分重要的。
三、5'→3'外切酶活性──切除修復(fù)作用
5'→3'外切酶活性就是從5'→3'方向水解DNA生長鏈前方的DNA鏈,主要產(chǎn)生5'-脫氧核苷酸。這種酶活性只對DNA上配對部分(雙鏈)磷酸二酯鍵有切割活力作用,方向是5'→3'。
每次能切除10個核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5'→3'外切酶活力達(dá)10倍以上。因此,這種酶活性在DNA損傷的修復(fù)中可能起著重要作用。對岡崎片段5'末端RNA引物的去除依賴此種外切酶活性。