四、焦磷酸解作用
DNApolⅠ的這種活性可以催化3'末端焦磷酸解DNA分子。這種作用就是無機(jī)焦磷酸分解DNA生長(zhǎng)鏈,可以認(rèn)為是DNA聚合作用的逆反應(yīng),而且這種水解DNA鏈作用需要有模板DNA的存在。(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA。
五、焦磷酸交換作用
催化dNTP末端的PPi同無機(jī)焦磷酸的交換反應(yīng)。反應(yīng)式為32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA。
dna聚合酶共性
[1]以脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)為前體催化合成DNA。
[2]需要模板和引物的存在。
[3]不能起始合成新的DNA鏈。
[4]催化dNTP加到生長(zhǎng)中的DNA鏈的3'-OH末端。
[5]催化DNA合成的方向是5'→3'。
(1)依賴DNA的DNA聚合酶。
(2)依賴RNA的DNA聚合酶。
(3)依賴DNA的RNA聚合酶。
(4)依賴RNA的RNA聚合酶。
前兩者是DNA聚合酶,它使DNA復(fù)制鏈按模板順序延長(zhǎng)。如在原核生物中僅就大腸桿菌中已被發(fā)現(xiàn)的就有三種(分別簡(jiǎn)稱為PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等)。DNA聚合酶只能在有引物的基礎(chǔ)上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,這DNA的合成方向記為5′→3′。
換言之DNA聚合酶催化反應(yīng)除底物(αNTP)外,還需要Mg2+、模板DNA和引物,迄今細(xì)胞內(nèi)尚無發(fā)現(xiàn)可從單體起始DNA的合成。
同樣,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反應(yīng)中主要的RNA合成酶,它們以四種三磷酸核糖核苷(NTP)為底物,并需有DNA模板以及Mn2及Mg2的存在下,在前一個(gè)核苷酸3′-OH與下一個(gè)核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯鍵,其新生鏈的方向也是5′→3′。
RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的細(xì)胞中。如大腸桿菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5條多肽鏈組成,分別命名為α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。
真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12個(gè)大小不等亞基組成。
聚合酶除作為自然界生命活動(dòng)中不可缺少的組分外,在實(shí)驗(yàn)室中大多用作生命科學(xué)研究的工具酶類之一。
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