理化鑒別中常用的分析方法有化學分析法和薄層色譜法。
對比了蛇膽汁和雞膽汁中的氨基酸及微量元素，發(fā)現蛇膽汁與雞膽汁均含有18種氨基酸，雞膽汁中除了牛磺酸含量略低于蛇膽汁外，其他氨基酸的種類和含量非常相似;蛇膽汁中微量元素Ca、Mg、Fe、Zn、Cu的含量均略高于雞膽汁。
通過膽囊外觀性狀，膽汁的K2Cr2O7沉淀、糠醛-硫酸顯色反應以及薄層色譜法(TLC)，鑒別了眼鏡蛇膽檢品，認為該方法簡單、專屬性強，可作為真?zhèn)紊吣懙蔫b別方法。
用糠醛-硫酸法鑒別了蛇膽及其偽品雞膽、鴨膽、魚膽等，認為該法結果可靠，簡便易行，但不能鑒別蛇類種屬。薄層層析法由于具備色譜分離特性，因此更適合分析復雜樣品。
以?；悄懰釣閷φ沼帽訉游龇ǚ治隽搜坨R蛇蛇膽樣品并見到8個顯色斑點。
此外，TLC法還被廣泛用于蛇膽復方制劑的鑒別研究。
綜上所述，牛磺膽酸等成分為對照用TLC法可有效鑒別出復方制劑中的蛇膽，但不能區(qū)別蛇膽的種屬來源。
1.4分子生物學鑒定
由于蛇膽保存和制劑加工過程中的處理方法往往破壞了蛇膽的完整性，因此依據性狀、顯微特征及理化性質進行鑒別有一定困難，分子生物學方法能克服上述問題，呈現更客觀的結果。眾所周知，物種的多樣性是基因多態(tài)性的結果，而基因多態(tài)性可在分子水平上檢測，它比在形態(tài)、組織和化學水平上檢測更能代表其變異類型的遺傳標記。
將分子標記技術運用到蛇類藥材的鑒定研究中，對游蛇科10種蛇基因組DNA的多態(tài)性進行了分子遺傳標記的研究;通過提取金錢白花蛇及其偽品藥材和原動物樣品的模板DNA，分析其Cytb基因片斷鑒別了金錢白花蛇。
分子生物學鑒別方法雖能有效鑒別出蛇類藥材的種屬來源，目前在蛇類藥材的鑒別中應用較廣，但由于市售蛇膽樣品的復雜性，蛇膽DNA的含量較低，故此法在蛇膽鑒別中的應用較少，具體應用方案還有待于進一步完善。
蛇膽及其制劑的含量測定
目前蛇膽藥材及其制劑中蛇膽的含量測定多以總膽酸或?；悄懰猁}為指標，測定方法主要是紫外分光光度法、薄層掃描法(TLCS)和高效液相色譜法(HPLC)。
