免疫球蛋白(Mr1.5×105)比血清中主要蛋白質(zhì)白蛋白(Mr6.7×104)的分子大得多，抗體在30%—50%飽和度的硫酸鹽中析出，而白蛋白需在70%—80%飽和度才析出，因此常用33%飽和度的硫酸胺純化血清中的IgG。
鹽析時為了減少抗體變性，需在4℃進行，同時用pH8.0緩沖液稀釋抗血清，以減少蛋白濃度過高而發(fā)生共沉淀。銨鹽的溶解度不隨溫度變化而明顯改變，0℃和25℃僅差3%，而鈉鹽則相差5倍，因此常在低溫沉淀時用銨鹽，室溫沉淀用鈉鹽。銨鹽對抗體的標記反應(如FITC和biotin標記時)有一定的干擾作用。
鹽析法只能部分純化抗體，更高純度的抗體制劑可用層析法制備。IgM五聚體相對分子質(zhì)量達9.7×10，比血清中任何其他蛋白都大，用分子篩層析很容易將其純化。IgG在PH8.0時帶負電荷，能與DEAE纖維素上的陽離子結(jié)合，因此可用離子交換層析來純化IgG。
IgG純化常用的方法為親和層析。IgG與葡萄球菌A蛋白和鏈球菌G蛋白具合高度的親和性，可用這兩種蛋白質(zhì)交聯(lián)親和層析柱將IgG純化。大部分IgG與蛋白A結(jié)合PH為8—9，洗脫PH為2—4;而與蛋白G的結(jié)合PH為5—7，洗脫PH為9—10。
C蛋白更適合于IgG的純化，不但反應條件為溫和的弱酸性或弱堿性，并且與IgG的結(jié)合力高于A蛋白。G蛋自能與大部分動物種類的IgG結(jié)合，而A蛋白對小鼠IgG1、大鼠IgG2b、人IgG3、馬和綿羊IgG結(jié)合力弱或不能結(jié)合G蛋白和A蛋白均不能與雞IgG結(jié)合。
抗血清或純化的抗體在低溫保存可維持活性數(shù)年，反復凍融使抗體很快失活，被細菌或霉菌污染的抗血清或IgG制品也易失去活性。稀釋的抗血清加入防腐劑疊氮化鈉和保護劑如BSA等可于4℃保存。長期保存常用等量甘油于—20℃以下冷藏。也可置于50%飽和硫酸銨中4℃保存，還可以冷凍干燥保存。
結(jié)語：通過上文的介紹，想必大家對于抗原抗體也是有了一個比較全面的了解了吧，抗原抗體在我們生活中還是比較多見的哦，希望上面的文章對大家有所幫助，祝患者早日康復哦。
